急性胰腺炎
尿胰蛋白酶原—2对诊断急性胰脲炎的临床应用
尿胰蛋白酶原—2对诊断急性胰脲炎的临床应用
周铁咸，杨小云，秦 庆，张 莹，童 开，袁亚娟，郝晓柯
(第四军医大学西京医院全军临床检验医学中心，西安 710032)
摘 要：目的 探讨快速试纸法检测尿胰蛋白酶原-2在急性胰腺炎(acute pancreatitis，AP)诊断中的临床意义。方法 对150例急腹症患者（其中重型100例，轻型50例）的血清和尿液标本分别测定尿胰蛋白酶原—2和血、尿淀粉酶(AMY)活性，并将结果进行比较。结果 尿胰蛋白酶原—2检测的敏感度、特异度分别为90. 1%和91. 5%；血AMY为81. 3%和81．4%；尿AMY为74. 7%和72. 8%。尿胰蛋白酶原—2对AP诊断的敏感度和特异度显著高于血、尿AMY检测。结论 快速试纸法检测尿胰蛋白酶原—2是急腹症患者中筛选急性胰腺炎快速而简便的方法，具有较高的特异度和敏感度。
关键词：尿胰蛋白酶原-2;急性胰腺炎；淀粉酶；急腹症
中图分类号：R576;R446. 112 文献标志码：A 文章编号：1671-7414(2009)02-119-03
doi:10. 3969/j. issn. 161-7414. 2009. 02. 049
Clinical Application of Urinary
Trypsinogen-2 in Diagnosing Acute Pancreatitis
ZHOU Tie-cheng, YANG Xiao-yun , QIN Qing, ZHANG Ying, TONG Kai, YUAN Ya-juan,
HAO Xiao-ke(Center of Clinical Laboratory Medicine of People’s Liberation Army ,
Xijing Hospital, Fourth Military Medical University , Xi’an 710032,China)
Abstract: Objective To study the clinical significance of urinary trypsinogen-2 in diagnosing acute pancreatitis with rapid paper method. Methods Examined urinary trypsinogen-2, blood and urine amylase activity separately in 150 cases of a-cute abdomen (100 with severe disease,50 with mild disease) with their serum and urine samples,and then compared theresults. Results The sensitivity and particularity of urinary trypsinogen-2 test in diagnosing acute pancreatitis respectivelyand particularity of urinary trypsinogen-2 was much higher than blood cr urine amylase. Conclusion Rapid paper method measured urinary trypsinogen-2 for diagnosing acute pancreatitis is a simple and fast method,which is also higher in particularity and sensitivity.
Keywords :urinary trypsinogen 2 ; acute pancreatitis ; amylase ; acute abdomen
急性胰腺炎(acute pancreatitis，AP)是胰腺及其周围组织被胰腺分泌的消化酶自身消化的化学性炎症，是一种临床上常见的严重急腹症，特别是急性重症胰腺炎，病情重、进展快，死亡率可高达40%，因此早期诊断显得尤为重要。AP主要分为轻型（水肿型）和重型（出血坏死型）两类。目前，血、尿胰淀粉酶(AMY)作为诊断AP常用的指标之一，由于其特异度和敏感度存在不足，不能满足临床诊断需要。特别是在消化道溃疡穿孔，急性腹膜炎、胆囊炎、胆石症患者中其血、尿AMY均可升高，有时胰腺已广泛坏死者血、尿AMY反而降低。Esko等[1]报道：在AP时，尿液中胰蛋白酶原—2含量明显升高，可用于AP的筛选诊断。为此，我们对1 50例急腹症患者进行了尿胰蛋白酶原—2和血、尿胰淀粉酶(AMY)的检测，以评价其与血、尿胰淀粉酶(AMY)相比在急腹症早期筛选AP的价值。
1 材料和方法
1. I 研究对象 疾病组：急腹症患者150例。其中男100例，女50例，年龄15岁一72岁，平均45岁；其中重度急腹症100例，轻度急腹症50例，腹痛时间为0.3～4 d，采集患者的血清和尿液标本后立即检测。以上患者均为2006年2月～2007年3月我院急诊及住院患者。诊断标准：根据1996年中华医学会外科分会推荐的诊断标准[2]，诊断急性胰腺炎，根据患者临床表现、CT、影像学、内窥镜、外科手术或病理检查确诊。将急性腹痛患者分为急性胰腺炎组和非急性胰腺炎组。
1. 2 试剂及仪器 尿胰蛋白酶原—2试剂盒由芬兰Medix Blochemica生物技术有限公司提供；AMY试剂盒由上海复兴长征公司提供，化学参数设定严格按试剂使用说明书操作。仪器：日立7600-120全自动生化分析仪。质控物为英国RAN-DOX公司定值血清。
1. 3 方法 ①标本收集：急诊患者的血、尿标本于急诊采集，并立即做尿胰蛋白酶原—2与血、尿AMY测定；住院患者采集腹痛3d内血、尿标本进行上述项目测定。②尿胰蛋白酶原—2检测：采用免疫层析法。将试纸条的检测端浸入尿液中约30 s，尿液被吸收渗透到试纸条上，标本中的胰蛋白酶原-2结合至试纸上单抗标记的蓝色乳胶颗粒，在5min内判断结果，若胰蛋白酶原—2超过50ug/L则出现两条蓝线，即阳性；若低于50ug/L，则只出现一条蓝色的质控线，即阴性；如果没有蓝线出现，则为检测失效，应重做。③血、尿AMY的活性检测：采用酶学速率法检测，底物为亚乙基-PNP-G7，D麦芽七糖苷对硝基苯酚(E-PNP-G7)。血清AMY的临界值设定为140 U/L，尿AMY界值设定为640 U/L。
1. 4 统计学处理 组间比较采用X2检验。
2 结果
150例急腹症患者中，91例确诊为AP，其中14例为急性重症胰腺炎，尿胰蛋白酶原—2检测82例为阳性，敏感度为90. 1%(82/91)；14例急性重型胰腺炎患者尿胰蛋白酶原—2均呈阳性，而其中2例血、尿AMY未升高。血清AMY升高74例，敏感度为81. 3% (74/91)；尿AMY升高68例，敏感度为74. 7%(68/91)。尿胰蛋白酶原—2检测的敏感度显著高于血、尿AMY活性检测（P<0．05）。
150例急性腹痛患者中，其他原因（非胰腺炎）所致的急性腹痛患者59例，其中5例尿胰蛋白酶原—2检测为阳性，特异度为91. 5%(54/59)；11例血AMY检测活性升高，特异度为81. 4%(48/59);16例尿AMY活性升高，特异度为72. 9%(43/59)。胰蛋白酶原—2检测的特异度显著高于血、尿AMY检测活性(P<0.05)。
3 讨论
胰蛋白酶原由胰腺生成，相对分子量为25 000，有胰蛋白酶原—1和胰蛋白酶原—2两种类型，其激活是AP发病机制中的重要环节。由于相对分子质量较小，胰蛋白酶原很容易由肾小球滤出，但胰蛋白酶原—2的重吸收率远低于胰蛋白酶原—l，因此尿液中胰蛋白酶原—2浓度较高。尤其AP时，尿液胰蛋白酶原—2浓度显著升高。
AP的诊断目前尚无金指标，临床上一直以来都将血、尿AMY作为急诊急腹症怀疑AP时的筛查指标。但临床实践表明，血、尿AMY的敏感度和特异度均不太理想，常造成漏诊和误诊。近年来的研究表明，尿胰蛋白酶原—2是急腹症中AP筛查较理想的指标[3,4]。在生理情况下由胰腺腺泡分泌入胰液，血及尿中含量很低，其激活是AP发病机制中的重要环节。当AP时胰腺组织受损，胰蛋白酶原大量释放入血，通过肾小球滤过，大部分胰蛋白酶原—1被肾小管重吸收，而胰蛋白酶原—2重吸收少，大量随尿液排出，文献报道AP患者在腹痛4h即可显著升高，其持续升高时间可达2w左右[5]。本研究结果显示：AP时，尿胰蛋白酶原—2的敏感度和特异度分别为90. 1%和91. 5%，明显优于血、尿AMY，与文献报道相近[6]。而AMY与AP的病情程度不呈正比，某些急性重型胰腺炎虽然临床表现很重，但血、尿AMY无明显升高[7]。本研究结果显示14例急性重型胰腺炎患者尿胰蛋白酶原—2均为阳性，而血、尿AMY有2例未见升高，Sainin等[8]，应用尿胰蛋白酶原—2分别检测重型胰腺炎和轻型胰腺炎，发现其结果差异有统计学显著性意义，说明尿胰蛋白酶原—2对重型胰腺炎诊断可能更具高敏感度。有一些非AP急腹症患者尿胰蛋白酶原—2升高，可能是胰腺受刺激的亚临床状态，或者是胆管或周围胆腺上皮挤压而导致胰蛋白酶原—2释放，也可能与肿瘤源性胰蛋白酶原—2有关，也应引起重视。重型胰腺炎或胰腺广泛坏死时，由于胰腺细胞广泛坏死，导致胰淀粉酶分泌过少，血、尿AMY不升高反而降低，而胰蛋白酶原—2升高，因此，尿胰蛋白酶原—2的检测可明显减少AP的漏诊。久置或污染的尿液标本可致尿胰蛋白酶原—2假阳性，故应及时送检。AP患者腹痛后约3～4h，尿胰蛋白酶原—2开始升高，1～3 d内达到高峰，持续时间为3～14 d，部分患者可持续30 d，持续时间可能与胰腺细胞坏死及病情的稳定程度有关。血、尿AMY分别在发病后8～12 h和12～24 h升高，血AMY在2-5 d恢复正常，尿AMY维持时间较长。尿胰蛋白酶原—2检测阴性时，很大程度上可排除AP，阳性结果应高度怀疑AP。
综上所述，层析法尿胰蛋白酶原—2检测试纸条操作简便、快速，仅需5 min即可发出报告。标本不需要预处理，实验无需特殊仪器，在急诊室及床前均可操作，更适用于基层医院。因此尿胰蛋白酶原—2可作为快速诊断AP的一个非常有价值的筛选指标得以推广。
参考文献：
[1] Esko A,Kemppaimen MD,Johan l,et a/. Rapid measurement of urinary trypsinogen-2 as a screening test for acute pancreatitis[Jl. N Eng J Med, 1997, 336:1788_1793.
[2] 中华医学会外科分会胰腺学组．急性胰腺炎的临床诊断及分级标准（1996年第二次方案）[J]．中华外科杂 ,1997.35(12) 773-775
[3] Hwang SJ, Chung JP, Kim YG,et at. Usefulness of urinary trypsinogen-2 dipstick test for diagnosis of a-cute pancreatitis [J]. Korean J Gastroenterol , 2004 , 43(6)：364．
[4] Chen YT, Chen CC, Wang SS,et a/. Rapid urinary trypsinogen-2 test strip in the diagnosis of acute pancreatitis[J]..Pancreas,2005,30(3):243.
[5] Lin ZS, Jiang co,oian Q,et a/. Early prediction ofsevere acute pancreatitis by urinary trypsinogen activation peptide [J]. Hepatobiliary Pancreat Dis Int,
[6] 杨炳华，金晓华，周金苟，等，尿胰蛋白酶原—2快速检测在急性胰腺炎诊断中的应用[J]．苏州大学学报（医学版），2004，24(3)：373．
[7] 袁耀宗，胰腺病学新进展与新技术[M]．上海：上海科学技术文献出版社，2001：284．
[8J Sainin V,Puoluk P,Kemppainen E,et a/. Serum trypsinogen-2 in the prediction of out come in acute necrotizing pancreatitis [J]. Scand JG as Troenterol ,1996, 31: 81
